کیت سنجش توتال پروتئین به روش Bradford
Bradford Protein Assay Kit
شماره کاتالوگ کیت: HT- Bradford-50
معرفی محصول
کیت سنجش توتال پروتئین به روش برادفورد شرکت دانش بنیان هوراطب فارمد، با بهره‌گیری از دانش فنی بومی و با استانداردهای جهانی، برای اندازه‌گیری کمی غلظت پروتئین‌ها طراحی و تولید شده است. این کیت با ارائه عملکردی سریع، حساس و مقرون‌به‌صرفه، نیاز آزمایشگاه‌های تحقیقاتی، تشخیصی و صنعتی ایران را به یک محصول باکیفیت داخلی برطرف می‌سازد.
ویژگی های کلیدی
محدوده رنج ماکرو |
25-2000µg/mL |
محدوده رنج میکرو |
2.5-25µg/mL |
تعداد تست ماکرو |
166tests |
تعداد تست میکرو |
333tests |
زمان تست |
کمتر از 10 دقیفه |
دمای نگهداری |
2-8°C |
User-Friendly |
|
Research Use Only (RUO) |
|
توضیحات
کاربردها
این کیت در طیف وسیعی از زمینه‌های تحقیقاتی و کاربردی قابل استفاده است:
- تحقیقات پایه در زیست‌شناسی مولکولی، بیوشیمی و سلولی
- کنترل کیفیت و سنجش غلظت در فرآیندهای خالص‌سازی پروتئین
- آزمایشگاه‌های تشخیص پزشکی و پژوهشی
- صنایع داروسازی و بیوتکنولوژی
- آزمایشگاه‌های آموزشی دانشگاه‌ها و مراکز علمی
روش برادفورد یک روش رنگ‌سنجی (Colorimetric) سریع و بسیار رایج برای اندازه‌گیری غلظت پروتئین‌ها است. اساس این روش بر پایه جابجایی رنگ‌زا (Dye-binding assay) استوار است.
اصل شیمیایی: رنگ‌زای مورد استفاده در این روش، کوماسی بریلیانت بلو G-250 (Coomassie Brilliant Blue G-250) است. این رنگ‌زا در محیط اسیدی به دو شکل وجود دارد:
- شکل Protonated: در حالت آزاد، به رنگقرمز متمایل به قهوه‌ای است و طول موج جذب آن ۴۷۰ نانومتر است.
- شکل Deprotonated: هنگامی که به پروتئین‌ها می‌چسبد، ساختار شیمیایی آن تغییر می‌کند و به شکلآبی درمی‌آید. در این حالت، طول موج جذب آن به ۵۹۵ نانومتر تغییر می‌یابد.
مکانیسم عمل: در محیط اسیدی، گروه‌های باردار مثبت روی پروتئین‌ها (مانند گروه‌های آمینه جانبی اسیدهای آمینه لیزین، آرژینین و هیستیدین) با گروه‌های سولفونات بار منفی روی مولکول رنگ برهمکنش می‌دهند. این اتصال، باعث تثبیت شکل آبی رنگ‌زا و در نتیجه ایجاد یک کمپلکس پروتئین-رنگ می‌شود.
جذب نوری: شدت رنگ آبی تولید شده مستقیماً با مقدار پروتئین موجود در نمونه نسبت دارد. با اندازه‌گیری جذب نوری در طول موج ۵۹۵ نانومتر و مقایسه آن با یک منحنی استاندارد، غلظت پروتئین مجهول محاسبه می‌شود.
مزایا:
- سرعت بسیار بالا:کل فرآیند تنها در ۵ تا ۱۰ دقیقه (بدون نیاز به انکوباسیون حرارتی) انجام می‌شود.
- سادگی:پروتکل آن بسیار ساده است (مخلوط کردن نمونه با معرف و خوانش جذب).
- حساسیت خوب:محدوده کاری معمول آن 5-2000 µg/mL است که برای بسیاری از کاربردها کافی است. حساسیت آن از روش BCA کمتر اما از روش Lowry بیشتر است.
- تداخل کم با عوامل رایج:نسبت به روش Lowry و حتی BCA، تداخل کمتری با معرف‌های رایجی مانند EDTA، DTT ، β-مرکاپتواتانول و کربوهیدرات‌ها دارد.
- تک مرحله‌ای بودن:این روش معمولا فقط شامل مخلوط کردن نمونه با معرف می باشد.
معایب:
- تداخل با detergentهای غیر یونی: حضور detergentهای قوی مانند Triton X-100, Tween-20, SDS حتی در مقادیر کم، به شدت در assay تداخل ایجاد کرده و باعث رسوب یا ایجاد کدورت می‌شوند.
- واکنش متفاوت با پروتئین‌های مختلف:این روش به ترکیب اسید آمینه‌ای پروتئین حساس است. پروتئین‌های غنی از اسیدهای آمینه بازی (مثل لیزین و آرژینین) مانند BSA، سیگنال بسیار قوی‌تری نسبت به پروتئین‌هایی مانند ایمونوگلوبولین G (IgG) تولید می‌کنند. بنابراین انتخاب استاندارد مناسب مثلاً استفاده از IgG به عنوان استاندارد برای سنجش آنتی‌بادی بسیار حیاتی است.
برای سفارش یا دریافت اطلاعات فنی بیشتر، با ما تماس بگیرید.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.