مزایا

• حساسیت بالا و نتیجه سریع: مناسب برای بررسی سریع آلودگی‌های پروتئین‌های سلول میزبان (HCPs)
• استفاده از آنتی‌بادی‌های پلی‌کلونال اختصاصی HCPs High-Five
• دستیابی به نتایج سریع و قابل‌اعتماد در کمتر از ۳ ساعت
• مناسب برای کارهای تحقیقاتی و صنعتی

سلول High-Five  (با نام علمی Trichoplusia ni  یا به طور رایج BTI-Tn-5B1-4 ) یک سل لاین حشره‌ای است که به طور گسترده در زیست‌فناوری برای تولید پروتئین‌های نوترکیب پیچیده استفاده می‌شود. این سلول‌ها توانایی بالایی در بیان پروتئین‌های دارای اصلاحات پساترجمه‌ای (مانند گلیکوزیلاسیون) دارند که برای کاربردهای دارویی و واکسن‌ها حیاتی است.

پروتئین‌های میزبان ( Host Cell Proteinsیا HCPs) به تمام پروتئین‌هایی گفته می‌شود که به طور ذاتی توسط سلول میزبان (High-Five) تولید می‌شوند، نه آن پروتئین نوترکیبی که هدف فرآیند تولید است. به عبارت ساده، HCPs ناخالصی‌های پروتئینی هستند که از خود سلول ناشی می‌شوند. بنابراین هنگامی که یک محصول دارویی (مانند یک آنتی‌بادی یا پروتئین درمانی) از کشت سلولی High-Five استخراج می‌شود، این محصول ۱۰۰ درصد خالص نیست و حاوی مقادیر کمی از هزاران پروتئین مختلف میزبان است. حضور این HCPs می‌تواند:

• ایمنی بیمار را به خطر بیندازد:برخی HCPs می‌توانند واکنش‌های ایمونوژنیک قوی ایجاد کنند و منجر به عوارض جانبی شدید شوند.
• بر پایداری دارو تأثیر بگذارند: برخی HCPs آنزیم‌هایی هستند (مانند پروتئازها) که می‌توانند محصول دارویی مورد نظر را تجزیه کرده و باعث کاهش اثربخشی یا تشکیل aggregates (توده‌های پروتئینی) شوند.
• کیفیت و یکنواختی محصول را تحت تأثیر قرار دهند: تغییرات در پروفایل HCPs بین دسته‌های مختلف تولید (Batch-to-batch variation) می‌تواند نشان‌دهنده یک فرآیند تولید غیرقابل کنترل باشد.

پروتئین های حاصل از سلول میزبان در High-Five دارای چالش‌ها و ویژگی‌های خاصی هستند که آن‌ها را از HCPs در سیستم‌های رایج دیگری مانند سلول‌های CHO (تخمدان همستر چینی) متمایز می‌کند، از جمله:

• تنوع گسترده:پروفایلHCPهای High-Five بسیار پیچیده است و می‌تواند شامل صدها تا هزاران پروتئین مختلف با غلظت‌های بسیار متفاوت باشد.
• وجود آنزیم‌های قوی: محیط سلول‌های حشره‌ای حاوی آنزیم‌های گوارشی قوی (پروتئازها، لیپازها، نوکلئازها) است که بقایای آن‌ها می‌تواند برای محصول نوترکیب بسیار مضر باشد.
• ویژگی‌های گلیکوزیلاسیون: الگوی گلیکوزیلاسیون پروتئین‌های High-Five با پستانداران متفاوت است. این می‌تواند HCPها را از نظر ایمونوژنسیتی متمایز کند.
• واکنش‌پذیری متقاطع (Cross-Reactivity):توسعه کیت‌های ELISA برای اندازه‌گیریHCPهای High-Five چالش‌برانگیز است. آنتی‌بادی‌های پلی‌کلونال مورد استفاده باید علیه کل مجموعهHCPهای این سلول تولید شوند تا تمامی انواع آن‌ها را شناسایی کنند. اگر آنتی‌بادی‌ها به خوبی طراحی نشوند، ممکن است برخی HCPها شناسایی نشوند.

پروتئین‌های میزبان High-Five (HCPs) چالش اصلی در تولید داروهای نوترکیب با استفاده از این سیستم بیان هستند. مدیریت آن‌ها یک وظیفه پیچیده اما ضروری است که مستلزم:

• پیشگیری در بالادست:با استفاده از سلول‌های مهندسی‌شده و بهینه‌سازی فرآیند کشت
• حذف در پایین‌دست:با طراحی یک فرآیند خالص‌سازی قوی و چندمرحله‌ای
• نظارت و تحلیل دقیق:با استفاده از دو روش مکمل ELISA (برای کمّی‌سازی سریع) و LC-MS/MS (برای شناسایی دقیق و عیب‌یابی) می باشد.

درک کامل پروفایلHCPهای High-Five و چگونگی کنترل آن‌ها، کلید موفقیت در استفاده از این سیستم بیان قدرتمند برای تولید داروهای بیولوژیک ایمن و مؤثر است. بنابراین نظارت دقیق برHCPها نه تنها یک معیار نظارتی است، بلکه نشان‌دهنده تعهد به تولید داروهای بیولوژیک ایمن، باکیفیت و مؤثر برای بیماران است. پیشرفت‌های آینده در زمینه مهندسی سلول (مانند حذف ژن‌های آنزیم‌های مضر)، پروتئومیکس (مطالعه کلیه پروتئین‌ها)، مهندسی متابولیک سلول های میزبان و روش‌های خالص‌سازی نوین، به ادامه کاهش ریسک ناشی از این آلاینده‌های مهم کمک خواهد کرد.

برای سفارش یا دریافت اطلاعات فنی بیشتر، با ما تماس بگیرید.